[经验交流] 胶原蛋白降解物高效液相色谱/质谱联用分析

摘要：利用高效液相色谱/质谱联用技术分析了胶原蛋白II和I经变性和酶解处理得到的多肤混合物，比较研究了两种类型胶原蛋白降解物之间的区别，利用液相色谱质谱连用技术识别出了不同类型胶原蛋白中的特征肤段。胶原蛋白在50℃处理3h可溶解于盐溶液，凝胶过滤分析结果表明，热变性的胶原蛋白分子量在10万以上，因此在热变性过程中胶原蛋白的三螺旋结构被破坏但没有明显的随机降解。利用胰蛋白酶对胶原蛋白进行了酶切处，在酶用量为2%,pH 8.1一8.2,温度37℃条件下，处理20h后胶原蛋白降解较完全，多肤混合物的平均分子量在1万以下。利用液质联用技术研究II型和I型胶原蛋白降解物中的多肤，通过多级质谱分析了胶原蛋白降解物多肤的序列。结果表明，不同类型的胶原蛋白酶解后的多肤混合物中存在特定序列的特征肤段，利用特征肤段进行胶原蛋白类型识别是可行的。

关键词：胶原蛋白，酶解，高效液相色谱，质谱。


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