[资源分享] 紫外分光光度法测定半边旗二萜类化合物5F滴眼液的含量

摘要 目的：建立半边旗二萜粪化合物5F滴眼液的含量测定方法。方法：采用紫外分光光度法测定滴眼液中5F的含量，检测波长为242nm。结果：线性范围为20～100μg／mL(r=0.9994)，日内、日间RSD为1.0％～2.0％，平均回收率为100.6％。结论：紫外分光光度法专属性好，操作简便，能准确检测出滴眼液中5F的含量。
    关键词：半边旗；5F滴眼液；紫外分光光度法；含量测定
    Determination of a Diterpenoid Compound 5F in Eye Drops by Ultraviolet Spectrophotometry
    Nan,Wu Kefeng,Li Baohong,Liang Nianci
    Abstract Objective：To establish an ultraviolet spectrophotometry method for determination of a diterpenoid compound ent-11 α-hydroxy-15oxo一kaur-16-en-19-orc acid (5F) in eye drops．Methods：The content of 5F in eye drops was determination by ultraviolet spectrophotometry． 5F was detected in wavelength 242nm、Results：The linear range of 5F was over 20～100 μg／mL with a correlation coeficient of 0.9994．The precision within-day and between-day were 1.0％～2.0％，the average recovery of 5F was 100.6％、Conclusion：This method is simple，accurate and suitable for determination of 5F in eye drops．
    Key words：Pteris semipinnata L；5F in eye drops；ultraviolet spectmphotometry；determination
    半边旗系凤尾蕨科植物，民间用于治疗外伤出血、跌打损伤、目刺肿痛等。本课题组研究发现半边旗提取物具有抗肿瘤活性；最近有研究报道，半边旗提取物中ent-llα-hydroxy-l5oxo-kaur-16-en-19-ore acid(简称5F)对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞具有抑制作用，因此考虑将其制备成滴眼液。由于5F在水中溶解度很小，而其结构中含有1个羧基，因此考虑用氢氧化钠溶解，制备成水溶性钠盐。笔者首次建立了将半边旗二萜类化合物5F制成钠盐后的定量测定方法。
    1 材料和方法
    1 1 仪器和试剂
    752型紫外-可见分光光度计(上海第一仪器厂)；UV-3101 PC紫外扫描仪(日本岛津)；S-320 pH计(梅特勒一托利多上海有限公司)；5F参照品(由本研究室邓亦峰老师提供)；其余试剂均为分析纯。
    1．2 配制方法
    精密称取5F参照品，用2％的氢氧化钠溶液溶解后，加入pH为8.98的硼酸盐缓冲液，用微孔滤膜过滤，加水至刻度，制成浓度为2.5 mg／mL的5F溶液。
    2 结果
    2 1 紫外吸收光谱图
    取5F参照品按1．2项下方法配制溶液，进行紫外扫描，最大吸收波长为242nm，在200～400nm波长范围内辅料未见有吸收。
    2．2 标准曲线的制备
    精密称取5F参照品，用2％的氢氧化钠溶液溶解，加入pH为8.98的硼酸盐缓冲液，配成浓度为2.5 mg／mL的贮备液；吸取贮备液，用蒸馏水稀释成20，40，60，80，1O0 μg／mL系列浓度的对照品溶液，在242nm波长处测定吸收度。以吸收度(A)为纵坐标，对应浓度(C)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为：A=0.0347+0.0l392C(r=0.9994)。该方法在20～100μg／mL范围内呈良好线性关系。
    2．3 日内、日间精密度试验
    按2．2项下方法配制3种浓度的5F溶液，测定日内、日间精密度。
    2．4 回收率试验
    精密称取一定量的5F，用2％的氢氧化钠溶液溶解，加入pH为8.98的硼酸盐缓冲液，配成浓度为2.5 mg／mL供试品液备用。吸取该供试品液1mL，置50mL容量瓶中，再加入5F参照品1mg，用pH为8.98的硼酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，在242nm波长处测定吸收度，代人回归方程计算结果。
    2．5 样品含量测定
    按1．2项下方法，配制6份浓度为2.5 mg／mL的样品，分别以三蒸水稀释50倍，在242nm波长处测定吸收度，计算含量。
    3 讨论
    5F在242nm波长处有最大吸收，而其他成分在所选波长处无吸收，说明对测定无干扰。本法操作简便，有较好的精密度和回收率，可用于直接测定5F钠盐的含量。
参考文献：
[1]崔燎，梁念慈．半边旗体内外抗癌作用及急性毒性研究[J]．中药材，1996，19(1)：29—32．
[21张晓，崔燎，田中信寿，等．半边旗有效成分及抗肿瘤活性研究[J]．中国药学杂志，1997，32(1)：37—38．
[3]李金华，梁念慈，莫丽儿，等．半边旗5种成分体外细胞毒活性比较及构效关系分析[J]．药学学报，1998，33(9)：641—644．
[4]王映芬，陈毓东．半边旗二萜类化合物5F对人翼状胬肉成纤维细胞增殖的抑制作用[J]．中国中医眼科杂志，2002，12(2)：74—78．
[5]毕殿洲．药剂学[M]、第4版．北京：人民卫生出版社，2000：369—377