[资源分享] 紫外分光光度法测定胡椒碱

摘要：本文研究了胡椒碱的乙醇溶液在紫外光谱区有一个灵敏的吸收峰，其最大吸收波长为342mm，据此建立了一个简单、快速、选择性好的测定胡椒中胡椒碱含量的新的紫外分析法。本法胡椒碱浓度在0～70μg／ml范围内服从比耳定律。
    关键词：紫外分光光度法；胡椒碱
    目前，市售胡椒粉掺杂使假者较多，其测定方法多为定性方法 。关于胡椒中胡椒碱的定量分析曾经有薄层紫外扫描法和比色法，前者受仪器条件的限制，一些基层单位尚难普及，后者较前者繁杂。本文介绍一种容易推广的直接紫外光度法，该方法简单、快速、准确。
    1 试剂与仪器
    1．1 试剂无水乙醇、活性炭、胡椒碱标准储备溶液。精密称取胡椒碱0.1000g用无水乙醇溶解于容量瓶中，并定容为100ml；胡椒碱标准使用溶液临用时吸取储备液10.0ml于100ml容量瓶中，以无水乙醇定容至刻度。
    1．2 仪器724-1型分光光度计
    2 实验方法
    2．1 标准曲线制作
    分别吸取0.00、0.05、0.10、0.30、0.50、0.70ml胡椒碱标准使用溶液于10.0ml比色管中，用无水乙醇稀释至刻度，混匀。用1cm比色杯，以无水乙醇作参比，于波长342nm处测吸光度，绘制标准曲线。
    2．2 样品中胡椒碱的提取与测定
    准确称取经粉碎并全部通过100目筛过筛的样品约0.1g于50ml烧杯中，加人0.1g活性炭后加人少量无水乙醇，在电炉上小心热至沸腾。分次过滤于100ml容量瓶中，以无水乙醇少量多次淋洗，定容至刻度，混匀。然后吸取5ml于10ml比色管中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。以下操作与标准曲线制备相同，进行分光光度测定。
    3 结果与讨论
    3．1 吸收光谱
    实验表明：胡椒碱在无水乙醇介质中的吸收光谱，其最大吸收波长λmax为342nm，本文选择该波长下进行测定。
    3．2 活性炭用量的选择
    样品的色泽对吸光度有一定影响，选用活性炭脱色，过滤后比色，效果较好。取五份胡椒碱含量一致的有色样品，分别加入活性炭0．0、0.1、0.2、0.3、0.4g。实验表明：加入0.1g活性炭脱色效果好；少于0.1g脱色不完全；大于0.2g吸光度偏低。故本文试验选用活性炭用量为0.1g。
    3．3 溶剂的选择
    分别用无水乙醇与1．2～～二氯乙烷作为溶剂，实验表明：两种溶剂吸收光谱相近，无显著性差异。由于1．2～ ～二氯乙烷对人体有一定的毒害作用，故选用无水乙醇作为溶剂。
    3．4 乙醇浓度的选择
    乙醇浓度对吸光度影响较大，在提取胡椒中胡椒碱时，本文分别选用lO％、30％、50％、80％的无水乙醇作为溶剂，对同量样品进行实验。实验表明：lO％、30％提取液混浊，影响比色；50％、80％及无水乙醇的提取液呈透明状态，但以无水乙醇提取液在342nm处吸收峰为最大，故本文选用无水乙醇作为溶剂。
    3．5 标准曲线
    实验表明：在0～70μg／ml范围内遵守比耳定律。以回归分析法处理相关系数r=0.9998，最低检出限为5μg／ml。
    3．6 精密度
    取2份样品，在不同时间内按操作方法进行7次平行测定，其相对标准偏差为2.1～4.3％
    3．7 方法的准确度试验
    样品中加入不同量的胡椒碱标准使用液按本法操作，回收率为94.2～96.9％ ，平均94.5％
    3．8 干扰
    在已知胡椒碱含量的三份溶液中，分别加入辣椒粉、桂皮粉、茴香粉各0.1g，按本法操作，测得结果比原来降低1.5～1.7％ ，说明基本无干扰。
参考文献
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