固相微萃取-气／质联用法测定尿中的海洛因代谢物

作者:陈剑刚，白艳玲

    关键词：气相色谱-质谱联用法；固相微萃取；海洛因；代谢物
    1 实验部分
    1．1 仪器与试剂
    Shimadzu QP5050A GC／MS仪，EI源(70eV)，GC-17AAFC流量控制，分流／不分流进样口，GC Solution 软件工作站。固相微萃取(SPME)手柄，7μm和l00μmPDMS纤维头与85μmPA纤维头(Supelco公司)。吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因、乙酰可待因及海洛因标准品均购自公安部物证鉴定中心，用甲醇配成lg／L标准储备液，冷藏备用。
    1．2 气相色谱-质谱(GC／MS)条件
    DB-l毛细管柱(30m ×0.25 mm×0.25μm )；程序升温：120℃(2min)通过20℃/min到280℃(8min)；He流速1.0mL／min；进样口温度250℃；接口温度280℃；无分流进样3min；溶剂延时2min。质谱扫描范围50～400U，扫描速率0.5s；倍增器电压1.1kV。质谱定性采用全扫描方式(SCAN)，定量采用选择离子方式(SIM)。
    1．3 尿样测定
    取吸毒者吸毒后24 h内的尿液2.0 mL置于4mL样品瓶中，加碳酸钠一碳酸氢钠缓冲液(pH 9)1.0mL，旋紧垫有橡皮垫的盖子，放入SPME装置中，将SPME针插入样品瓶垫内，使PA纤维头浸入尿样吸附30min后迅速转移至GC／MS的进样口于250℃下解吸3min。
    1．4 标准曲线的制作
    分别用甲醇配制含吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因、乙酰可待因及海洛因均为0.5，1.0，2.0，5.0，10.0，20.0 mg／L的系列混合标准溶液，实验方法同“1．3”节，以各自峰高定量。
    2 结果与讨论
    2．1 GC／MS分析的总离子流图及质谱图
在对尿样进行定量分析时，为提高检测的选择性和灵敏度，从质谱图中选择m／z 285，299，327，341及369分别作为吗啡、町待因、6-单乙酰吗啡、乙酰可待因和海洛因定量检测的特征离子。
    2．2 萃取纤维头的选择
    PDMS纤维头对非极性物质的吸附性较强，而PA更易吸附极性物质。尿中海洛因的主要代谢物吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因均含有极性强的羟基，容易被PA吸附。考察了7μm和l00μm PDMS及85μm PA纤维头在相同条件下对5 mg／L各组分混合标准液萃取，结果发现PA纤维头解吸后所得峰面积明显高于PDMS纤维头，故本法选用85μm PA萃取纤维头。
    2．3 萃取时间的选择
    将PA萃取纤维头浸入添加6一单乙酰吗啡、可待因及吗啡混合标样的尿液中，按“1．3”节操作，分别吸附10，20，30，40，60min．得到各组分峰面积响应值与萃取时间的关系图。结果表明，萃取时间越长，响应值越大，且分子质量较大的组分对萃取时间的变化更敏感，达到平衡的时间更长。为得到较高灵敏度下的最短分析时间，选择30min。
    2．4 解吸条件的选择
    将进样口温度设在230～280℃ 以考察解吸温度的影响，结果表明在此区间内解吸量没有太大的变化。在250℃
下选择1～10min的解吸时间实验，结果表明，1min可将纤维头上所有代谢组分解吸出来。考虑尿样基体成分复杂，选择在250℃下解吸3min，以保持纤维头再使用时无污染。
    2．5 线性关系、精密度、最小检测限与回收率
    在上述优化的实验条件下，对不同浓度海洛因代谢物的混合标准液进行线性关系及重现性试验，并对其线性范围和检测限进行测定。结果表明，各组分的峰高与其浓度在所测范围内线性关系良好，r为0.997 0～0.9996；用配制的标准溶液测定方法的精密度，相对标准偏差(RSD)为4.5％～7.6％；以3倍信噪比计算5种组分的最小检测限为0.05～0.15 mg／L；另对5种组分的加标回收率进行实验，结果为87.8%～97.3%。