气相色谱一质谱法测定复方薄荷脑滴鼻液中2组分含量

作者:余继英 ，何林，孙世明，王怀芾，曾明辉

摘要: 目的：建立以气相色谱一质谱法测定复方薄荷脑滴鼻液中薄荷脑及樟脑含量的方法。方法：以DM-5(0.25mm×30m)弹
性石英毛细管柱为色谱柱，乙萘酚为内标，升温程序为80℃～150℃，分别选择M／Z为95、71的离子碎片峰对樟脑、薄荷脑进行
检测。结果：樟脑的浓度线性范围为1.04～10.40μg／ml(r=0.9998)，回收率为101.2％；薄荷脑的浓度线性范围为
0.824-8.24μg／ml(r=0.9999)，回收率为99.98％。结论：本方法快速、准确，可用于同类制剂的质量控制。
关键词:气相色谱-质谱法；樟脑；薄荷脑；含量测定

    Determination of the Contents of Camphor and Menthol in Compound Menthol Nose Drops by GC-MS YU Jiying，
    HE Lin，SUN Shiming，WANG Huaifei，ZENG Minghui(Dept．of Pharmacy，People’s Hospital of Sichuan Province，Chengdu 610072，China)

ABSTRACT: 0BJECTIVE： To determine the camphor and menthol in compound menthol nose drops by GC —
M S．M ETH0DS：Camphor and menthol were determined by GC-MS with SIM mode and β-naphthol was selected as the internal standard．RESULTS： The calibration curves of camphor and menthol were linear in the ranges of 1.04～ 10.40μg／ ml
(r=0.9998)and 0.824～8.24μg／ml(r=0.9999)and the recoveries were 101.2％ and 99.98％ respectively．C0NCLUS10N：
The method is quick，accurate and also suitable for quality control of the preparation．
KEY W0RDS: GC-MS；Camphor；Menthol；Content determination

    复方薄荷脑滴鼻液是一种常用的医院制剂，主成分为樟脑和薄荷脑，具有润滑粘膜、消炎、止痛等功效，主要用于干燥性和萎缩性鼻炎及伤风、鼻塞等的治疗。目前，对薄荷脑和樟脑的含量测定方法报道虽然较多，但未见有采用气相色谱质谱法(GC-MS)同时测定其中两组分的文献报道。笔者联用GC-MS，以乙萘酚为内标，同时对样品中的薄荷脑及樟脑进行含量测定，取得了令人满意的效果。

1 仪器与试药
    气相色谱-质谱联用仪(GCMS—QP5050A，日本岛津)；DM-5弹性石英毛细管柱(0.25mm×30m，Dikma公司)。
薄荷脑对照品(中国药品生物制品检定所，批号：0728—200005)；樟脑对照品(中国药品生物制品检定所，批号：747—2000004)；复方薄荷脑滴鼻液(四川省人民医院药剂科自制，批号：021217、030121、030217)；乙萘酚及乙酸乙酯均为分析纯。

2 方法与结果
2．1 色谱条件
    进样口温度：200℃ ；接口温度：250℃ ；载气：氦气；流速：1.Oml／rnin；柱前压：67kPa；分流比：20：1；升温程度：柱温80℃恒温2min，以5℃／rain的速率升温至150℃ ，维持3min后结束。
    樟脑对照品的保留时间与样品峰l的保留时间基本一致，薄荷脑对照品的保留时间与样品峰2的保留时间基本一致，内标乙萘酚的保留时间与样品峰3的保留时间基本一致。通过谱库检索证实峰1为樟脑，峰2为薄荷脑，峰3为乙萘酚。
2．2 质谱条件
    EI源(70ev)；在SIM 模式下，于8.50min～8.84min时选择碎片离子95对樟脑进行检测，8.84min～9.15min选择碎片离子71对薄荷脑进行检测，13.00min-14.50min选择碎片离子144对乙萘酚进行检测。
2．3 实验溶液的制备
2．3．1 内标储备液的配制：精密称取乙萘酚5.69mg，置于25ml容量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度
为227.6μg／ml的内标储备液。
2．3．2 薄荷脑对照溶液的配制：精密称取薄荷脑对照品4.12mg，置于25ml容量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，
摇匀，得浓度为164.8μg／ml的薄荷脑对照溶液。
2．3．3 樟脑对照液的配制：精密称取樟脑对照品5.2mg，置于25ml容量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓
度为208μg／ml的樟脑对照溶液。
2．4 标准曲线制备
    分别精密吸取樟脑及薄荷脑对照品溶液各50、100、200、300、400、500μl，置于10ml量瓶中，各精密加入内标储备液40μl，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀。分别取1μl进样，在上述色谱一质谱条件下进行测定，每种浓度的标准溶液连续进样3次。以樟脑与乙萘酚的峰面积之比RA1的平均值对樟脑浓度C进行线性回归，得樟脑的回归方程为RA1=0.01281+0.2086C1 (r1=0.9998)；以薄荷脑与乙萘酚的峰面积之比RA2 的平均值对薄荷脑浓度C2 进行线性回归，得薄荷脑的回归方程为RA2=-0.05618+0.3001 C2 (r2 =0.9999)。
结果表明，樟脑在浓度为1.04～10.40μg／ml范围内、薄荷脑在浓度为0.824～8.24／μg／ml范围内分别呈良好的线性关系。
2．5 精密度试验
    取樟脑浓度为10.40μg／ml、薄荷脑浓度为8.24μg／ml的标准溶液，连续进样5次，分别测定其峰面积与内标峰面积，计
算其比值并求得樟脑的相对标准差为0.49％，薄荷脑的相对标准差为0.96％，表明精密度均较好
2．6 稳定性试验
    取同一样品溶液，每隔1h进样1次，测定樟脑及薄荷脑含量，4h内两组分相对标准差分别为1.21％ .1.45％ ，表明样品溶液在4h内基本稳定。
2．7 重现性试验
    取同一批号(021217)样品，按“2．9”项方法测定5次，樟脑及薄荷脑相对标准差分别为0.78％、1.36％，表明测定方法重复性较好。
2．8 回收率试验
    取同一批号(021217)样品，按“2．9”项方法稀释后，分别精密吸取内标液40μ1、样品稀释液、樟脑及薄荷脑对照品溶液适量(使樟脑及薄荷脑量相当于样品含量的80％、100％及120％)置于10ml容量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，取
1μl进样分析。
2．9 样品含量测定
    精密量取复方薄荷脑滴鼻液lml，置于10ml量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀。取稀释液50μ1，置于10ml量瓶中，加入内标储备液40μ1，以乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，制得供试品溶液。取供试品溶液lμl，按上述色谱及质谱条件进行分析，在SIM模式下，于8.50min～8.84min测定m／z为95的峰面积，于8.84min～9.15min测定M／Z为71的峰面积，并分别计算于13.00min～14.50min测定的M／Z为144的峰面积比值，将各自的比值代入标准曲线方程，计算出樟脑及薄荷脑的含量。

3 讨论
    复方薄荷脑滴鼻液为一常用制剂，已被《中国医院制剂规范》收载，但对其中的薄荷脑及樟脑仅规定了定性鉴别，笔者利用已有条件建立的定量检测方法，可更好地控制该制剂质量，为安全用药提供保障。联用GC-MS同时测定樟脑及薄荷脑的方法目前尚未见文献报道，利用谱库检索帮助定性和SIM方式定量可排除杂质干扰，增加灵敏度。研究证明，本法重现性好，结果准确，可作为同类制剂质量控制的方法。