急急急!有谁知道大鼠怎样取血量才大一点?我做中药的慢性毒理实验,按要求灌药1个月,每个星期要取血化验,量多,2-3ml左右,抽股动静脉试过,但难抽。有谁抽过?请指教。需要切开大鼠的皮肤?为了下次抽血,需要将切开的皮肤缝合吗?谢谢!
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断尾取血。
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眼眶采血比较好
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眶后静脉丛或者是颈静脉
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眶后静脉丛或者是颈静脉
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用乙mi麻醉,然后用毛细管从大鼠眶后静脉取血,又快又省力。
最好是有专门的人麻醉,另一人取血,麻醉时间不要太长,可以观察,大鼠瘫软后,取血,取血时最好剪掉胡须,这样可避免血液流到胡须上发生溶血。
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实验动物的采血方法——大鼠、小鼠
⒈剪尾采血
需血量很少时常用本法,如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作血涂片等可与此法。动物麻醉后,将尾尖剪去约5mm,从尾部向尾尖部按摩,血即从断端流出。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。如不麻醉,采血量较小。采血结束后,消毒、止血。
用此法每只鼠可采血10余次。小鼠可每次采血约 0.1ml,大鼠约 0.4ml。
⒉眼眶后静脉丛采血
穿刺采用一根特制的长7~10cm硬的玻璃取血管,其一端内径为 1~1.5mm,另一端逐渐扩大,细端长约 1cm即可,将取血管浸入 1%肝素溶液,干燥后使用。采血时,左手拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定,并轻轻压迫颈部两侧,阻碍静脉回流,使眼球充分外突,提示眼眶后静脉丛充血。右手持取血管,将其尖端插入内眼角与眼球之间,轻轻向眼底方向刺入,当感到有阻力时即停止刺入,旋转取血管以切开静脉丛,血液即流入取血管中。采血结束后,拔出取血管,放松左手,出血即停止。
用本法在短期内可重复采血。小鼠一次可采血0.2~0.3ml,大鼠一次可采血 0.5~1.0ml。
对大鼠损伤小,建议尝试使用
⒊颈(股)静脉或颈(股)动脉采血
将鼠麻醉,剪去一侧颈部外侧被毛,作颈静脉或颈动脉分离手术,用注射器即可抽出所需血量。大鼠多采用股静脉或股动脉,方法是:大鼠经麻醉后,剪开腹股沟处皮肤,即可看到股静脉,把此静脉剪断或用注射器采血即可,股动脉较深需剥离出,再采血。
⒋摘眼球采血
此法常用于鼠类大量采血。采血时,用左手固定动物,压迫眼球,尽量使眼球突出,右手用镊子或止血钳迅速摘除眼球,眼眶内很快流出血液。
⒌断头采血
用剪子迅速剪掉动物头部,立即将动物颈朝下,提起动物,血液可流入已预备好的容器中。
假如切开皮肤,取血完毕,需要将切开的皮肤缝合。
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wzlumin wrote:
急急急!有谁知道大鼠怎样取血量才大一点?我做中药的慢性毒理实验,按要求灌药1个月,每个星期要取血化验,量多,2-3ml左右,
抽股动静脉试过,但难抽
。有谁抽过?请指教。需要切开大鼠的皮肤?为了下次抽血,需要将切开的皮肤缝合吗?谢谢!
建议采取颈动静脉、股动静脉取血法。
注射器要沿动静脉
走向
刺入血管。
另外,建议保持鼠笼内垫料干燥,防止切口感染。必要的话,给予适量的青霉素。
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颈动脉窦取血,量多可靠!
不用麻醉,大鼠取平卧位固定。
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采用玻璃采血管,将一根完整的玻璃管用脚或手撇成两段,用破碎端的直接旋转插入大鼠眼球后端静脉丛中,注重刺入后见血停止用力,抓取大鼠时最好用两个手指抵住鼠下腭防止乱动.取完血后用棉花压迫取血端放回笼中饲养.在平常做保健品降脂实验常用此方法取血,你可参考相关实验方法
实验动物采血完全指南
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毛细管眼眦取血法:毛细管折成两段,用平口一端取血,不能用破碎端,假如碎玻璃留在眼眦内,大鼠眼眦会产生炎症,很可能导致大鼠取血的眼睛坏死。
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恩,我也觉得毛细管眼眦取血的方法比较适合楼主的需要。但要注重,要把四周的鼠毛处理干净,要不轻易导致溶血的发生。另外,取血完毕后,立即松开按压在颈部的手,必要时可以使用一点止血海绵帮助止血,以便下次再取。完事后可以用适量生理盐水灌胃以补充体液,不过要注重别牵拉眼部,免得造成再次出血。
另外,怕大鼠挣扎,可以选用少量乙mi麻醉一下再取血!
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我绝的实验方法不太可行,因为大鼠总共才8ml左右的血,要想取2_3ml,我看只有动刀子了,那就不能保证它还能很好的活着
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可以这样试试:根据采血时间点,半小时前ig5%NSGS 1ml/100g,心脏穿刺缓慢抽血,每次最多1ml.可以分离血清,固定稀释。
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颈静脉窦取血,方便快捷.不用麻醉,仰卧十字架方式固定,嘴角下与锁骨交界处,每次取2-3ml不成问题,不影响动物状况!我们做长毒、药代、糖耐量等都用这种方法。很好的!
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标准的有两种方法。
一种是楼上提到的颈动脉窦取血。无需麻醉。用左手将大鼠双上肢向后伸直,使其颈部紧张,右手抽取。具体抓老鼠的方法很难用文字描述。这种方法要练习一段时间,主要两点:抓老鼠的方法和右手取血时的手感。
另一种是尾动脉取血。将老鼠用气体麻醉,放平。左手用拇指、食指、中指固定鼠尾,右手拇指、食指捏临床用的静脉采血针,与鼠尾平行进入尾动脉。静脉采血针后端与3ml注射器相连,刺入尾动脉之前先回收注射器使注射器内有部分空气,这样在准确刺入尾动脉后,就会立即有鲜红动脉血流入注射器。 主要难点:准确刺入尾动脉的感觉,要反复练习一段时间方可达到一针见血;由于早期练习时,时间长,老鼠轻易醒,麻醉就成了问题。我做的时候因为有专门的气体麻醉机,所以就不是问题,实在不行就只能腹腔麻醉了。
另一种就是尾静脉取血,前面过程相似。不同之处在于,于鼠尾根部用橡皮筋收紧尾巴,用止血钳固定橡皮筋,这是尾静脉比较明显,然后用采血针抽血,刺入后,松开皮筋,另一手由上而下抚压尾巴使静脉血流入注射器内。
以上三种方法创伤相对比较小,第一种最好,但我感觉也是最难上手的,假如熟练的话,做药动学很管用,特点对于隔半个小时就采集一次血时。第三种两个人操作好一些,一个人有时不轻易固定采血针。我最喜欢尾动脉取血,也最熟练这种方法。
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看了楼上的这么多贴子,我还是建议用眼眶取血比较好,既不会留下多大伤口,又能多次抽出你要的血量来,虽然眼眶取血需要一定的技术,但是练练都没有问题的,有几个需要注重的地方:第一是采血管要合适,太粗不易扎进去,太细轻易凝血和折断,本人常用硬质中性玻璃毛细管,内径0.9-1.1mm,壁厚0.10-0.15mm,使用时折成4cm左右长度;第二是手法,左手的拇指和食指将大鼠的眼皮分开,暴露眼珠,右手的拇指和食指捏住毛细管,从眼睛内眦,45度角插入,右手拇指和食指要不停地转动,使毛细管扎进去,待出血后左手将大鼠的头稍偏过来,就会血流泉涌!记住取完后拔出毛细管用干净的棉花压迫眼睛一会儿止血。为了防止大鼠挣扎,可以用干燥器里放一些棉花和乙mi,把大鼠放进去,看着它瘫软后赶紧拿出来取血,时间长了要死鼠的。
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O2/Co2 混合气体轻度麻醉,颈静脉窦穿刺采血,可多次多点采。我们刚做过一个3个月的试验,采用的就是这种方法。我们有专门设计的大鼠保定台。
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眼眶取血像这种情况可以取3ml没问题,我最多取到过6ml
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都是高手啊!还是颈静脉和股动脉抽血较方便.其余操作要求较高
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duanxuzhuxi wrote:
动物采血完全指南
这个似乎没有小香猪大量取血的指南呀!
想请教一下楼上的各位做小香猪模型的药带动力学的抽血部位及方法?!
(我查了实验动物学的指南,只有猪的少量取血方法,而且没有具体的说明。)
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内眦取血操作简单,损伤小,取血量可在2ml.不用麻醉,操作简单.适合连续取血.一般第二天即可恢复.操作同前面同学介绍.注重要点一定将大鼠眼球暴突,使静脉充分充盈.否则取血量可能不足.
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我有个好办法。
就是在大鼠颈静脉置管法。大鼠可以自由活动。具体方法介绍如下,请各位多多指教。
采用清洁手术, 戊巴比妥钠(40 m g/k g) 腹腔麻醉。手术分颈前颈后两部分, 一次完成。1。颈静脉插管术 动物麻醉后取仰卧位, 任选一侧备皮, 从外上到内下斜行切开1~ 1. 5cm , 向深层分离出颈静脉。结扎颈静脉远端, 在静脉管壁上向心做“V ”型切口, 切入深度为静脉的1/2~ 2/3, 将预充入肝素的硅胶管从切口处向心插入, 深度约2. 5 cm。结扎固定硅胶导管, 推抽与导管末端相连的注射器, 若插管正常, 推入肝素盐水时感觉顺畅, 回抽有血。
2。颈背部手术 颈胸部手术完成后, 将动物俯卧, 颈后部备皮, 横切皮肤约1 cm。用不锈钢引导管从皮下贯通颈前后两处切口, 硅胶管游离端从其中引至颈后, 截取适当长度, 与皮下金属管的Sect ion B 相连。皮下金属管固定于局部肌肉组织, 缝合皮肤。
术后立即注射青霉素(40 万单位) 防止感染。动物手术后2~ 4h 清醒, 期间体温过低轻易导致死亡, 应加以防护。恢复3 d, 天天通过导管缓慢推入肝素溶液1 m l, 保持导管畅通。恢复期和术后实验期均应注重观察动物有无异常, 如饮食、健康(Health care)状况、感染、出血、插管位置等,有问题及时处理。
个人实践认为此方法很好,不知是否对楼主有帮助。
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楼上的方法我们常用,很方便很好用.
这种情况下动物不怎么痛苦.
比眼眶采血好很多.
但是对技术和环境要求比较高.
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我觉得心脏取血比较方便,而且一次可以取2-3ml,没有问题,用输液用的针头,两个人配合,一个人抽,另外一个人把针插入心脏左心室、或者右心室。试验过程中要注重,不要反复插入心脏,插入之前要摸准确心脏的位置,整个心脏取血试验应该不难。
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大家说的真好,只有在才能看到这样热烈的讨论""
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眼眶采血很方便,我做过大鼠降脂实验 半月去一次血, 能取3-5ml, 大鼠不会死.
没做过的 可以用2只费鼠试试,一旦有了手感,以后就没问题了
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建议采取颈动静脉、股动静脉取血法,眼眶取血难度大,不过也可行。
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国外常采用的非手术采血方法,采血量及一些注重事项:
但愿对大家能有所帮助