[经验交流] Leica TCS SP5 激光扫描共聚焦显微镜

一、评论大纲
型号：Leica激光扫描共聚焦显微镜 TCS SP5
优点： 配备AOBS，允许直接利用新染料和激光，确保极好的敏感性。
缺点：整合进采图软件的3D重建模块太慢
概要：非常敏感且用户友好操作界面的共聚焦显微镜

二、产品评论正文
 
    当我们实验室想要买一台新共聚焦显微镜时，我想从市场的最新型号中选一款。我们主要利用共聚焦显微镜对荧光标记的不同蛋白进行定量分析，观察它们瞬间的位置和表达变化。对于我们来说，拥有一台能够精确辨别每个荧光探针的不同状态、灵敏的捕捉信号和重复定量化结果的好仪器是很重要的。Leica 光谱型共聚焦TCS SP5配备AOBS使我受益非浅。机器包含4个激光器： 405 nm激光， 氩离子激光 (laser lines 457, 476, 488 and 514 nm)， 561 nm激光，氦氖 633 nm激光，共四个检测通道。整个系统搭建在倒置显微镜 DMI 6000 Trino上。
   
  和其他产品相比，这款共聚焦显微镜的特点是：首先，专利的AOBS设备，显著增强系统的敏感性。实际上，采用二次分光镜分光会造成多达30%发射光的损失，而AOBS却能保证更多发射光的通过。同时，作为一个光学可调元件，它能直接用于新染料和激光谱线的检测，因而避免再加其他滤光片和二次分光镜。

    在一个多标记系统中，几个荧光基团常常导致串色。在这个系统中，多达5个光谱检测器和分光部件棱镜保证了信号的特定性。另外，PMT可根据温度做自我调整，因此不必提高电子噪音，增益就能达到1200V，大大提高了系统的敏感性。配合AOBS，这些特点确保了非常良好的信号还原。

    另一个创新特色是SuperZ 载物台，它保证在做大的3D切片时不失焦，Z轴移动范围1.5 mm. 这个载物台也可以实现XY电动操作，因此，可做感兴趣区域拼图。
    软件操作界面友好，不必考虑常用特定染料的硬件配置，操作也很方便。
    光谱分辨率3 nm，光谱范围 400-- 800 nm ，能够实现已有和未知染料的解串色问题。

    还有，可在基础软件上添加其他软件模块，如值得推崇的3D重建模块 (然而这个模块不够快，不能执行象Imaris软件完成的一些特定程序) 和容易实现FRAP、FRET、比率测量实验（如钙离子）的LCS 生理学模块。而且它能实现以8192 x 8192的分辨率采图, 结合新的扫描器可高速采图(多达250幅/秒)，视场也足够大。

    总之，我非常高兴向每个要买一流共聚焦显微镜的人推荐这个型号。

作者信息：
    Alexandra Khomitch-Baud
        Scientist
        Cellular Imaging Department
        Biovays
        France